EM - IUEM - Tecnologias Laboratoriais em Ciências Forenses
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- Análise comparativa dos teores de Tetrahidrocanabinol e Canabidiol em Cannabis Sativa L. recolhida em festivais de música em PortugalPublication . Rodriguez, Carlota Joaquina Brás; Quintas, Alexandre; Neng, Nuno da Rosa; Torres, Maria Edite da Silva OliveiraA Canábis continua a ser a substância ilícita mais consumida em Portugal, sendo os festivais de música contextos privilegiados para o seu uso recreativo. A caracterização química dos produtos em circulação e a análise dos comportamentos associados constituem, por isso, um contributo importante para desenhar estratégias de redução dos problemas de saúde e para recolha de informação para o sistema de justiça. Neste estudo foi utilizada uma metodologia mista, integrando a análise química com recurso a Cromatografia gasosa acoplada à espetrometria de massa (GC-MS) e Cromatografia líquida de alta eficiência acoplada ao detetor de díodos (HPLC-DAD) e a aplicação de questionários, com o objetivo de avaliar os teores de delta-9-ácido-tetrahidrocanabinólico (Δ⁹-THC), canabidiol (CBD) e o rácio entre ambos os canabinoides (Δ⁹-THC/CBD) bem como as tendências de consumo de Canábis em festivais realizados entre 2023 e 2025, respetivamente. Foram analisadas 140 amostras, incluindo 88 recolhidas diretamente em três festivais de música ao longo dos 3 anos e 52 provenientes do serviço de drug checking da Kosmicare no festival Binóide 2025. A metodologia analítica aplicada, previamente desenvolvida no Laboratório de Ciências Forenses e Psicológicas da Egas Moniz, permitiu quantificar os canabinoides e determinar os rácios Δ⁹-THC/CBD. Os resultados demonstraram elevada heterogeneidade entre amostras, com rácios Δ⁹-THC/CBD a variar entre <1 e ≈85. Cerca de metade das amostras apresentou rácios >5, compatíveis com perfis recreativos, enquanto outras evidenciaram teores mais elevados de CBD. Verificou-se ainda uma tendência decrescente, ao longo dos três anos, nos teores de Δ⁹-THC e nos rácios Δ⁹-THC/CBD, associada ao aumento relativo de CBD. A quantificação de CBN demonstrou a sua utilidade enquanto marcador de degradação, permitindo a distinção entre amostras frescas e material previamente consumido. Os inquéritos envolveram sobretudo jovens entre os 18–25 anos, tendo permitido a associação entre o consumo de Canábis com o consumo de tabaco, álcool, hospitalização devido ao consumo de substâncias de abuso e a influência que o ambiente de festival exerce no consumo da mesma. Do ponto de vista legal, a grande maioria das amostras excedeu o limite de 0,3% de Δ⁹-THC estabelecido para o cânhamo industrial, classificando-se como ilícitas. O presente estudo constitui um trabalho piloto pioneiro em Portugal, onde são avaliados perfis químicos e dados percecionais sobre o consumo em ambiente real de festivais. Os resultados obtidos revelam um mercado recreativo em evolução, marcado por maior diversidade química e tendência recente para rácios Δ⁹-THC/CBD menores. A metodologia desenvolvida e as evidências recolhidas fornecem base para estudos futuros e podem apoiar entidades oficiais na monitorização e regulamentação da Canábis.
- Análise de amostras da Kosmicare por técnicas cromatográficas e espetroscopia de ressonância magnética nuclearPublication . Barra, Bárbara Filipa Coelho; Rodrigues, Helena Gaspar do Nascimento; Quintas, Alexandre; Neng, Nuno da RosaO panorama europeu relativo às substâncias de abuso tem sofrido alterações profundas ao longo dos séculos, refletindo na evolução dos padrões de consumo e adaptações constantes do mercado ilícito. Atualmente, observa-se um aumento das novas substâncias psicoativas (NPS), que representam um desafio crescente para a saúde pública, autoridades reguladoras e entidades de investigação. Apenas em 2024, foram reportadas 47 novas NPS na Europa. Neste contexto, a monitorização destas substâncias assume um importante papel na deteção precoce e na implementação de estratégias de redução de riscos, nomeadamente através dos serviços de drug checking (DCS). O presente trabalho foi desenvolvido em colaboração com a Kosmicare, tendo como objetivos a análise de 337 amostras recolhidas pelo DCS entre 2020 e 2025, de modo a identificar as substâncias presentes, avaliar padrões de consumo, caracterizar agentes de corte e monitorizar NPS emergentes. As amostras foram analisadas recorrendo à cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa (GC-MS) e, quando necessário, à espectroscopia de ressonância magnética nuclear (NMR), técnicas que permitem caracterizar a composição química das amostras. No total foram identificadas 24 diferentes substâncias conhecidas, das quais se destacam a cocaína, heroína e 3,4-metilenodioximetanfetamina (MDMA), bem como alguns dos seus derivados e, ainda, substâncias dissociativas, como a 2-fluoro descloroketamina. Foram também detetados nas amostras os canabinoides naftalen-1-il-(1-pentilindazol-3-il)metanona (THJ-018) e hexahidrocanabinol (HHC). Salienta-se a primeira deteção de um novo nitazeno (5-ciano isotodesnitazeno) numa amostra de rua, o que reforça a importância da monitorização contínua das substâncias de abuso. Neste estudo também foi possível detetar a presença de agentes de corte na maioria das amostras, evidenciando os riscos adicionais associados ao consumo de substâncias cortadas. Entre as substâncias mais prevalentes destacam-se a MDMA e a cocaína. Em suma, este estudo contribuiu para uma melhor compreensão do perfil das substâncias de abuso encontradas no serviço de DCS da Kosmicare ao longo dos últimos anos. Para além de refletir as tendências de consumo, permitiu detetar uma nova NPS no mercado ilícito, reforçando a importância da monitorização e da colaboração entre os serviços de redução de riscos e os laboratórios na resposta aos desafios colocados por estas substâncias.
- Análise de metais nobres marcados com técnica de dispersão de partículas de diamante (UniqueMark®)Publication . Kroeger, Zenaide; Gonçalves, Nuno Miguel Mendonça da Silva; Sousa, Catarina Bernardes; Costa, Joana Couceiro daHá mais de 600 anos que a marcação de peças em ouro e prata é utilizada em Portugal para que se possa distinguir as suas origens e a sua autenticidade em caso de roubos e falsificações e ainda hoje é uma técnica recorrente, entretanto, com poucas inovações feitas desde a sua génese. Este foi um desafio para a equipa de pesquisadores e cientistas da Imprensa Nacional Casa da Moeda (INCM) que inovaram este método com uma moderna técnica de dispersão caótica de partículas de diamante sob o punção tradicional e artesanal, criando assim um padrão único como uma impressão digital. Este padrão é registado através de captura de imagem por microscopia e registada numa base de dados, dando assim uma identidade à peça. Este trabalho teve como base objetivos específicos elaborar técnicas de desgaste de metais preciosos, perceber qual a durabilidade do padrão através das análises e testes de desgaste elaborados e adaptados para este propósito. Estes ensaios tiveram como propósito expor as marcas a várias situações adversas como uso diário, abrasão, temperaturas extremas e exposição aos químicos para detetar eventuais alterações no padrão em relação ao registo existente na base de dados. Após a finalização de todos os processos analíticos, pode-se concluir que as marcas com dispersão de partículas de diamantes sujeitas aos testes físicos e químicos, permanecem intactas, sem alterações que comprometam o padrão de dispersão. Outro objetivo era apresentar a utilidade do UniqueMark® em outro enquadramento forense, como uma ferramenta a ser utilizada como método secundário na identificação de vítimas de desastres em massa. Na pesquisa efetuada sobre as técnicas de identificação de vítimas em desastres de grandes proporções, foi possível observar a elevada probabilidade de aplicação da técnica UniqueMark® como método secundário de identificação. Esta possibilidade dá-se em virtude do padrão único de reconhecimento e da longa durabilidade do padrão de dispersão constatada neste trabalho.
- Análise de modificações intencionais em remanescentes esqueléticosPublication . Rapaz, Cristina Isabel Fuzeta; Antunes-Ferreira, Nathalie; Curate, José FranciscoOs remanescentes esqueléticos humanos são uma valiosa fonte de informação para entender as culturas e práticas sociais de povos pretéritos, podendo remeter a eventos de natureza religiosa, quotidiana ou histórica. A presente dissertação centra-se na análise de modificações intencionais em remanescentes esqueléticos de indivíduos com possíveis afinidades populacionais africanas, provenientes do adro da Capela do Espírito Santo, em Bucelas. Foi estimado o perfil biológico de 16 dos indivíduos e também o seu perfil patológico. Estudaram-se alterações corporais intencionais, através da observação de modificações morfológicas no esqueleto, que foram identificadas exclusivamente nos dentes em seis indivíduos desta amostra. As modificações identificadas podem ter tido realizadas devido a tradições culturais, estética, práticas sociais ou como um meio de identificação e identidade de tribal. Para além de contribuir para a compreensão histórica, social e cultural de grupos populacionais passados, também estabelece uma possível ligação com populações contemporâneas referidas em trabalhos etnográficos nas ex-colónias portuguesas e evidencia a relevância das modificações corporais intencionais como marcadores bioculturais precisos para a reconstrução das identidades e modos de vida das sociedades passadas, oferecendo novas perspetivas sobre diversidade e complexidade das culturas ao longo dos séculos. Atualmente, a presença de modificações intencionais no esqueleto e no corpo pode auxiliar na identificação de indivíduos em investigações criminais.
- Análise de substâncias de abuso utilizando novas configurações de microextração em fase sólida e cromatografia gasosa-espetrometria de massa : estudo de prova de conceitoPublication . Rodrigues, Beatriz Mateus; Mateus, Eduardo Pires; Ahmad, Samir Marcos Esmail; Dias, Mário JoãoO consumo de substâncias de abuso é considerado um problema de saúde pública de grande importância, uma vez que limita a vida dos seus consumidores e desvia recursos de várias áreas da sociedade. Tendo em conta os problemas relacionados com o consumo das substâncias de abuso e os seus efeitos negativos consequentes, justifica-se cada vez mais o seu estudo, bem como o desenvolvimento de novos métodos analíticos, que permitam uma melhor monitorização das mesmas em contexto clínico, legal ou epidemiológico. Neste sentido, na presente dissertação realizaram-se diversos ensaios experimentais com o objetivo de avaliar a adequabilidade de novos métodos de preparação de amostras, baseadas em microextração em fase sólida (SPME), para a deteção de substâncias de abuso em matrizes biológicas, visando a sua potencial introdução como metodologias alternativas verdes. A análise quantitativa e qualitativa foi realizada por duas técnicas cromatográficas utilizando analisadores de massa diferentes: cromatografia gasosa hifenada à espetrometria de massa utilizando um analisador de tempo de voo (GC-TOF/MS) e cromatografia gasosa acoplada à espetrometria de massa em tandem (GC-TQ/MS), utilizando um triplo quadrupolo. Os dados obtidos indicam que a técnica de SPME com fibras de configuração clássicas e configuração tips é um método seletivo para a determinação dos compostos cocaína, cocaetileno, fentanilo e norfentanilo. Os resultados experimentais indicam igualmente que esta técnica de preparação de amostra é promissora para estas substâncias de abuso, sendo necessários estudos adicionais de otimização do método. Globalmente, os resultados demonstraram que as metodologias propostas são operacionalmente simples, amigas do ambiente e com um custo-benefício vantajoso. O investimento inicial na aquisição dos dispositivos baseados em SPME é rapidamente compensado pela sua capacidade de reutilização e baixo consumo de amostra e solventes orgânicos durante o ciclo analítico. Por outro lado, os métodos de preparação de amostra desenvolvidas ao longo do projeto de investigação, demonstram ser eficazes para o enriquecimento dos analitos alvo em matrizes biológicas, ao mesmo tempo que não descuram os princípios da química analítica verde e performance analítica.
- Análise e comparação de matérias-primas e objetos de impressão 3D FDM através da utilização da técnica de FTIR e da espetroscopia de Raman para uso na análise de armas de fogo impressasPublication . Campos, David Antunes; Manuel, Paulo Jorge; Família, Carlos; Pereira, José AntónioA impressão a três dimensões (3D) é um método de criação de objetos que tem vindo a ter um aumento na sua utilização por indivíduos sendo necessário que sejam criadas metodologias para a análise dos objetos que podem ser impressos com recurso a esta tecnologia, mais especificamente objetos que possam ser utilizados em atos criminosos e deixados nas cenas do crime, como armas de fogo. Nesta investigação foram usados filamentos de impressão 3D que foram depois utlizados para imprimir objetos, sendo esses os mais comumente usados por cidadãos comuns e que já tinham sido testados como apropriados para a impressão de armas de fogo. Para o seu estudo foram selecionadas duas metodologias de análise química: a espetroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR) e a espetroscopia de Raman. Ambos os métodos foram selecionados não só por serem apropriados para utilização em materiais sólidos como também por terem já sido testados como apropriados em prévios estudos para a análise de materiais de impressão 3D. Depois de terem sido aplicados os métodos selecionados os resultados foram comparados permitindo concluir que as metodologias se encontram preparadas para a utilização em materiais de impressão 3D e nos objetos impressos por estes mesmos, que podem ser encontrados em cenas de crime durante investigações. Os resultados permitiram também concluir que com a utilização das duas metodologias, é possível fazer uma diferenciação entre diferentes tipos de materiais de impressão, mas não entre filamentos do mesmo material provenientes de marcas diferentes e também não entre filamentos de impressão 3D e objetos impressos por estes. Neste último, é apenas possível fazer uma ligação entre eles.
- Análise não destrutiva de tintas de instrumentos de escrita manual : uma contribuição para a investigação forense de documentosPublication . Eusébio, Daniela Sofia Antunes; Bernardo, Maria Alexandra; Vieira, MárciaEnquadramento: A exigência da preservação de prova em tribunal continua a constituir um desafio à investigação laboratorial, em particular na análise forense de documentos, onde a resposta à discriminação dos utensílios de escrita e datação de documentos é recorrente nos quesitos solicitados. Objetivo: Pretendeu-se desenvolver uma ferramenta pericial, com base em técnicas não destrutivas, que permita a caracterização e discriminação de tintas de canetas comerciais, bem como a identificação de parâmetros de envelhecimento e eventual datação destas tintas. Materiais e Métodos: Foi efetuada uma pesquisa bibliográfica sistematizada para identificar técnicas não destrutivas que permitam a discriminação e datação de tintas e adquiridos corantes e instrumentos de escrita manual comerciais. Procedeu-se ao depósito dos corantes e das tintas em papel corrente e de filtro. Foram igualmente realizadas soluções em metanol e 2-fenoxietanol. As amostras obtidas foram caracterizadas por VSC, colorimetria e espectroscopias UV-Vis, Raman e FORS. Os dados foram tratados com recurso a excel, softwares spectragryph e KNIME Analytics Platform. Resultados e Discussão: Das 51 canetas exploradas por VSC, foram selecionadas 26 de diferentes tipos e modelos, que permitiram a construção de um modelo preditivo com base nos dados da colorimetria apresentando um poder discriminatório entre os 94,545% e 95,385%. Deste subconjunto, apenas 11 (5 azuis e 6 verdes) apresentaram sinal Raman e foram sujeitas a análise por UV-Vis e FORS. As espectroscopias UV-Vis e Raman sugerem a presença do corante solvente azul 38 em 9 das canetas das 11 canetas estudadas, a presença de ftalocianina de cobre (II) em duas delas e residualmente de outros corantes. Com base nos espectros obtidos por FORS e Raman foi igualmente construído um modelo preditivo com um poder discriminatório de 81,818% para FORS e de 72,727% para Raman. Foi ainda possível reconhecer parâmetros de envelhecimento para a tinta de 2 canetas azuis. Conclusão: Este estudo permitiu a construção de uma potencial ferramenta de discriminação de tintas de canetas com recurso a técnicas não destrutivas e a identificação de parâmetros de envelhecimento que poderão no futuro permitir a datação de tintas.
- Assessment of the viability of using Semiquant PSA quantification with SERATEC® SeraQuantTM as a confirmatory test for traces of semen in a forensic genetics laboratory : Idealization, development and validation of a methodPublication . Medeiros, Raquel; Silva, Alexandra Maia e; Ferreira, Paulo MiguelOs crimes sexuais representam uma grave violação dos direitos humanos e têm um impacto profundo nas vítimas e na sociedade. Eles correspondem a 10% dos crimes investigados pela Polícia Judiciária (PJ). Conforme especificado no Código Penal português (CP), os crimes de natureza sexual são distinguidos em dois grupos: crimes contra a liberdade sexual (artigos 163.º a 170.º) e crimes contra a autodeterminação sexual (artigos 171.º a 176.º-C). Ao realizar um exame forense de um crime sexual, o vestígio biológico mais importante a se procurar é o sémen. Este fluído é essencial nestes tipos de crimes, pois fornece uma prova incontestável de que um ato sexual foi cometido. Por esta razão, o Setor de Biologia (BBG) do Laboratório de Polícia Científica da Polícia Judiciária (LPC-PJ) tem investido em novos métodos e equipamentos para facilitar a identificação de sémen pelos peritos forenses. Neste trabalho, foi desenvolvido um método utilizando o instrumento SERATEC® SeraQuant Reader para os testes semi-quantitativos do Antígeno Prostático Específico (PSA). Para avaliar se este método poderia-se tornar um teste confirmatório, amostras de casos reais foram analisadas na fase de observação do fluxo de trabalho do BBG e os resultados obtidos nessa fase foram registados. Quarenta e oito amostras foram adquiridas de 25 exames de crimes sexuais e uma série de estudos de concordância foram realizados entre os resultados dos testes preliminares, o teste confirmatório e os perfis obtidos na análise de ácido desoxirribonucleico (ADN), com o objetivo de identificar possíveis relações. Além disso, o instrumento foi validado internamente realizando-se testes de sensibilidade, especificidade, reprodutibilidade e repetibilidade. Para as 48 amostras dos casos reais, os estudos de concordância demonstraram que, entre os valores de quantificação do PSA e os perfis da fração masculina (FM), cerca de 89% das amostras com alta concentração de PSA (acima de 4,1 ng/mL) estavam em concordância com o perfil de ADN obtido na FM (masculino ou mistura). Por outro lado, quase 87% das amostras que foram negativas para sémen apresentaram resultados positivos para PSA. Os resultados obtidos nos testes de sensibilidade, especificidade, reprodutibilidade e repetibilidade permitiram validar internamente o SeraQuant Reader.
- Associação entre os polimorfismos DRD4 VNTR-48 PB, MAOA UVNTR-30 PB e o comportamento agressivoPublication . Afonso, Luana Domingues; Quintas, Alexandre; Soeiro, Cristina; Costa, Joana Couceiro daEnquadramento: Agressão é o ato de tentativa e/ou execução de causar dano a outro indivíduo, designado de vítima. Inúmeros estudos têm vindo a demonstrar que uma das causas que pode influenciar a agressão são os fatores genéticos. Objetivos: O principal objetivo desta dissertação é analisar a associação entre a agressão e o VNTR SLC6A3 e VNTR MAOA, sendo o primeiro do sistema serotoninérgico e o segundo mais predominantemente do sistema dopaminérgico. Participantes: O estudo foi realizado a partir de uma amostra de estudantes que frequentam a Egas Moniz School of Health & Science, sendo composta por 32 voluntários, 4 do sexo masculino (12,5%) e 28 do sexo feminino (87,5%) com idades compreendidas entre 18 e 39 anos. Método: Recolha do material genético a cada participante, através de swab bucal, posterior genotipagem e entrega do questionário da Agressão Reativo-Proativo (RPQ). Resultados: Em relação ao VNTR SLC6A3, os alelos mais comuns foram 10R e 9R, relativamente ao VNTR MAOA, foram os 4R e 3R. Parece existir uma tendência mais acentuada dos heterozigóticos do polimorfismo VNTR SLC6A3, tanto para a agressão total quanto para a reativa. No entanto, o que apresentou valores mais elevados na agressão proativa foi o homozigótico 3R3R. Quanto ao VNTR MAOA, não houve evidências de nenhuma tendência significativa a não ser, no caso do sexo masculino do alelo 3R apresentar uma maior tendência para agressão comparativamente com o alelo 4R. Na análise dos dois polimorfismos juntos, o heterozigótico 4R3R do VNTR MAOA parece demonstrar uma tendência maior para a agressão independentemente da variante VNTR SLC6A3. No entanto, a junção 3R3R do VNTR SLC6A3 e 4R4R do VNTR MAOA foi a que apresentou o valor mais elevado na Agressão Proativa. Conclusão: Algumas variantes dos polimorfismos estudados parecem aumentar a tendência para agressão. No entanto mais estudos terão de ser realizados.
- Avaliação da fiabilidade da utilização de reagentes colorimétricos para a quantificação de Δ9-THC e CBDPublication . Nunes, Gonçalo de Carvalho; Família, Carlos; Quintas, Alexandre; Torres, Maria Edite da Silva OliveiraA crescente utilização de produtos derivados de Cannabis sativa L. e a necessidade de distinguir amostras com diferentes teores de Δ9-THC e CBD tornam essencial o desenvolvimento de métodos analíticos rápidos, acessíveis e aplicáveis em contexto forense. As técnicas cromatográficas tradicionais, embora extremamente precisas, apresentam limitações operacionais, custos elevados e reduzida aplicabilidade em análises de triagem no local. Neste contexto, os testes colorimétricos surgem como potenciais alternativas, apesar de serem historicamente utilizados apenas de forma qualitativa. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a fiabilidade dos reagentes colorimétricos mais utilizados (4-Aminofenol, Fast Blue B, Fast Blue BB, Duquenois–Levine e Fast Corinth V salt) na deteção e possível quantificação de Δ9-THC e CBD. Para tal, procedeu-se à purificação dos compostos a partir de uma amostra de Canábis, com graus de pureza superiores a 91% (CBD) e 99% (Δ9-THC), confirmados por GC-MS. Foram determinados os comprimentos de onda máximos para cada produto de reação, a estabilidade destes produtos ao longo de 24 horas, e o espectro dos compostos resultantes da reação destes reagentes com misturas dos dois canabinóides em diferentes proporções. Os resultados demonstraram que o 4-Aminofenol foi o reagente com melhor capacidade discriminatória, estabilidade, apresentando boa linearidade, maior sensibilidade e uma variação dos espectros proporcional à composição das misturas. O Fast Blue B revelou baixa robustez quantitativa e o Fast Blue BB apresentou elevada variabilidade e menor separação dos espectros, limitando a sua utilidade para quantificação. Conclui-se que o 4-Aminofenol representa a alternativa mais promissora para o desenvolvimento futuro de um método colorimétrico quantitativo rápido e de baixo custo para Δ9-THC e CBD, ainda que sejam necessários estudos adicionais de otimização e validação para garantir a sua aplicação consistente em rotina analítica.