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Desenvolvimento de método analítico para a quantificação de biomarcadores de etanol por LC-MS/MS
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| 1.14 MB | Adobe PDF |
Advisor(s)
Abstract(s)
Introdução:
O etil‐glucuronídeo (EtG) e o etil‐sulfato (EtS) são biomarcadores do consumo de etanol. Estes
compostos são metabolitos específicos do etanol resultantes da sua conjugação com uridina‐5
difosfo ácido glucurónico e com a 3‐ fosfoadenosina 5‐fosfosulfato, respetivamente.
A sua determinação analítica revela‐se uma mais‐valia em contexto forense, uma vez que estes
compostos permanecem detetáveis, em amostras biológicas, durante um período de tempo
mais alargado do que o etanol. Desta forma, a sua análise poderá ver vantajosa em casos de
alcoolismo, em situações em que é necessário verificar a abstinência do consumo de etanol, em
contextos laborais e, em situações post‐mortem, auxiliando na distinção entre a ingestão e a
formação post‐mortem de etanol.
Material e métodos
O método apresentado foi desenvolvido num equipamento de LC‐MS/MS (UPLC) da Waters,
tendo as amostras sido previamente submetidas a procedimento de precipitação proteica com
acetonitrilo. A separação cromatográfica foi efetuada recorrendo a uma coluna Acquity UPLC
HSS T3 (2,1x 100 mm; 1,8 µm de tamanho de partícula), usando como fase móvel uma mistura
de ácido fórmico 0,1% e metanol, em gradiente. A deteção dos compostos foi efetuada por
MRM, tendo a ionização sido feita por electrospray, em modo negativo.
Resultados:
Foram selecionadas duas transições para cada um dos compostos (EtG: 221>75; 221>85; EtS;
124,9>80,1; 129,9>96,9) e uma para o correspondente composto deuterado. O método revelou‐
se rápido, com apenas 6 minutos de análise cromatográfica e de fácil preparação da amostra,
permitindo detetar concentrações na ordem dos 100 ng/mL, para ambos os compostos, em
amostras de sangue e de urina.
Discussão e Conclusões:
A deteção de etanol é das análises mais importantes em termos forenses. Uma vez que o etanol
é rapidamente eliminado do organismo, revela‐se vantajosa a criação de metodologia para a
deteção dos seus biomarcadores. Os biomarcadores de álcool são indicadores fisiológicos de
exposição ou ingestão de álcool e podem indiciar consumo de álcool a nível crónico e/ou agudo.
Foi desenvolvido um método rápido para análise dos biomarcadores, EtG e ETS em amostras de
sangue e de urina. Após a necessária validação e participação adequada em ensaios
interlaboratoriais, este método poderá ser utilizado como resposta a questões médico‐legais
relacionadas com o consumo de etanol.
Description
Poster apresentado no 20º Congresso Nacional de Medicina Legal e Ciências Forenses/5ª Reunião da Rede de Serviços Médico-Legais e Forenses de Países de Língua Portuguesa
Keywords
LC-MS/MS Biomarcadores de etanol