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- Technical Note: “Mitochondrial and nuclear DNA approaches for reliable identification of Lucilia (Diptera, Calliphoridae) species of forensic interest from Southern Europe”Publication . GilArriortua, Maite; Saloña-Bordas, Marta I.; Cainé, Laura; Pinheiro, Fátima; M. de Pancorbo, Marian
- Application of indels (investigator DIPplex) in mixture samplesPublication . Carvalho, Ana; Cainé, Laura; Carvalho, Raquel; Pinheiro, Maria F.The main goal of this work was to study the application of the Investigator DIPplex kit to interpret mixtures linked with forensic cases, essentially those involved in the analysis of sexual crime samples. The study of these polymorphisms was performed in mixtures of two DNA controls included in commercial kits for the STRs typing, one male and the other female. The analysis was done according to the kit's manufacturer manual. The results were surprisingly better than expected, as the mixture interpretations were straightforward.
- Genetic Data of Four X-Chromosomal STRs in a Population Sample of Santa Catarina, BrazilPublication . Cainé, Laura; Pontes, Lurdes; Abrantes, David; Lima, Gabriela; Pinheiro, FátimaA total of 184 healthy unrelated individuals (70 females and 114 males), autochthonous from Santa Catarina, Brazil.
- Implementação da deteção molecular de SARS-CoV-2 na Delegação do Norte do Instituto Nacional de Medicina Legal e Ciências ForensesPublication . Fadoni, Jennifer; Magalhães, Jéssica; Cerqueira, Joana; Cainé, Laura; Amorim, AntónioA Doença do Coronavírus 2019, causada pelo vírus SARS-CoV-2, foi classificada como uma pandemia pela OMS em 11 de março de 2020. Até julho de 2023, foram registados mais de 768 milhões de casos, com mais de 6,9 milhões de mortes associadas. O objetivo do Laboratório de Virologia e de Análises Clínicas e Forenses da Delegação do Norte (LVACF-N) foi implementar a análise de deteção molecular de SARS-CoV-2 na Delegação do Norte do INMLCF, pois a deteção de casos de infeção por SARS-CoV-2 é de extrema importância para controlar a transmissão da infeção, o que por sua vez permite minimizar o impacto da COVID-19 na população e na demanda dos serviços públicos de saúde. A implementação da deteção molecular de SARS-CoV-2 na Delegação do Norte foi dividida em três etapas: i) Validação da metodologia de análise no equipamento de RT-PCR presente na Delegação do Norte, utilizando primers desenhados in house; ii) Avaliação do limiar de deteção do genoma viral; e iii) Validação do novo equipamento de RT-PCR adquirido para o LVACF-N, utilizando um kit comercial e também primers desenhados in house. Na fase I, foram realizadas análises de deteção molecular de SARS-CoV-2 em 61 zaragatoas nasofaríngeas colhidas post-mortem, utilizando primers desenhados in house. Os resultados foram comparados aos resultados de uma entidade externa, e foram obtidos valores de sensibilidade e especificidade iguais a 100%. Na fase II, foi possível detetar o genoma viral com uma concentração ínfima de 0,25 cópias/uL. Na fase III, foi avaliada a reprodutibilidade da análise no RT-PCR CFX96™ System em 30 amostras, utilizando primers desenhados in house e um kit comercial. Os resultados foram comparados aos resultados do equipamento validado na fase I, e não foi encontrada nenhuma divergência. Após a validação dos métodos e dos equipamentos, as análises de deteção molecular de SARSCoV- 2 em amostras colhidas post-mortem pelo Serviço de Clínica e Patologia Forense da Delegação do Norte, passaram a ser realizadas pelo LVACF-N. Entre 31/03/2023 e 21/07/2023, foram processadas 261 amostras, das quais 245 (93,87%) apresentaram resultado “negativo”, 12 (4,60%) “positivo” e 4 (1,53%) “indeterminável”; 177 (67,82%) foram colhidas em cadáveres do sexo masculino, 82 (31,42%) do sexo feminino, e 2 (0,76%) em cadáveres cujo sexo não foi identificado. A média de idade dos indivíduos foi de 63,25 anos, com valores entre 2 e 96 anos de idade. Em um curto intervalo de tempo, o LVACF-N validou metodologias e equipamentos, o que permitiu que as análises de deteção molecular de SARSCoV- 2 em amostras colhidas post-mortem pelo Serviço de Clínica e Patologia Forense desta Delegação, passassem a ser processadas internamente. Assim sendo, o LVACF-N aumentou a capacidade de autossuficiência do INMLCF, reduziu custos, possibilitou um maior aproveitamento de recursos, e pavimentou o caminho para a realização de outros tipos de análises de deteção molecular, a serem realizadas pelo LVACF-N num futuro próximo.
- In house Real-Time PCR multiplex for simultaneous detection of human influenza A and B virus and respiratory syncytial virusPublication . Fadoni, Jennifer; Cainé, Laura; Rodrigues, Joana; Mofreita, Vânia; Nascimento, Rui; Mukan, Olena; Corte Real, F.; Amorim, António
- Laser scanning microdissection - Advantages and pitfalls in forensic diagnosis.Publication . Cainé, Laura; Costa, Sergio; Correia-de-Sá, Paulo; Porto, Maria JoãoLaser microdissection (LMD) is a technology that has been around for more than 40 years. It combines the amplification power of a microscope with the precision cut of objects allowed by the laser technology. The main use of a Laser Microdissection System (LMS) is for clinical purposes, in order to isolate cells or its components of interest. Only in the last decade has LMD been used for forensic purposes, mainly in sexual assault casework for isolating sperm cells from vaginal swabs. Sexual assault cases are among the most difficult scenarios that forensic laboratories have to deal with. Several factors impact the achievement of a result that either implicates or exonerates a suspect. Among these factors, the most important are the quality of the sample, the amounts of DNA present or even their relative proportions in a mixture. Sometimes the interpretation of the mixture is complex, mainly without reference samples from the victim and the suspect. The LMD technology allows the selection of individual cells based on morphology (e.g. sperm cells opposed to epithelial) or on labeling with specific fluorescent dyes for posterior analysis. Mixture analysis with an azoospermic or oligospermic contributor is even more challenging. In the absence of sperm cells, male and female cells are indistinguishable, requiring the use of specific fluorescent dyes. The use of these techniques can also pave the way for detection of enough cells for analysis. Here we try to gather the main options to undertake laser microdissection analysis in forensic casework, highlighting in particular the pros and cons of combining LMD with fluorescence identification of interest specimens to increase accuracy and to speed-up isolation.
- Allele frequencies of sixteen STRs in the population of Northern PortugalPublication . Pinheiro, M.F.; Cainé, Laura; Pontes, Lurdes; Abrantes, David; Lima, Gabriela; Pereira, Maria J.; Rezende, PedroAllele frequencies of sixteen autossomal short tandem repeats (STRs), D3S1358, VWA, D16S539, D8S1179, D21S11, D18S51, TH01, FGA, D5S818, D13S317, D7S820, TPOX, CSF1PO, Penta D, Penta E (included in the PowerPlex 16 kit), and the SE33 (PowerPlex ES Monoplex System SE33) were determined in a sample of 200 healthy unrelated individuals from the north of Portugal.
- Genetic Data of 4 X-Chromosomal Short Tandem Repeats in a North of Portugal PopulationPublication . Cainé, Laura; Pontes, Lurdes; Abrantes, David; Lima, Gabriela; Pinheiro, FátimaOne hundred unrelated females and 100 unrelated males, autochthonous, healthy, from the North of Portugal.
- Genetic Data of Five STR Loci in a Population Sample of Santa Catarina, BrazilPublication . Pinheiro, Fátima; Lima, Gabriela; Abrantes, David; Pontes, Lurdes; Cainé, LauraIn routine forensic casework, it is important to establish a population database for further reliable statistical analysis.
- Allele Frequencies of 15 Loci Using AmpFℓSTR Identifiler Kit in a Northern Portuguese PopulationPublication . Abrantes, David; Lima, Gabriela; Cainé, Laura; Pontes, Lurdes; Pinheiro, Fátima250 unrelated and healthy individuals from Portugal.