Utilize este identificador para referenciar este registo: http://hdl.handle.net/10400.26/17348
Título: Estudo do crescimento de estirpes de Rhizobium para a produção de proteínas e de inoculantes
Autor: Carita, João Nuno Carichas
Orientador: Farinha, Noémia do Céu Machado
Palavras-chave: Crescimento microbiano
Expressão de proteínas
Produção de inoculantes
Rhizobium
Biotecnologia
Fermentação
Microbial growth
Protein expression
Inoculants production
Biotechnology
Fermentation
Data de Defesa: 8-Out-2008
Resumo: O objectivo da primeira parte do trabalho consistiu em estabelecer condições de crescimento microaerofilo em fermentadores, para a produção industrial de Bradyrhizobium japonicum com vista à obtenção de células com citocromo oxidase cbb3 expresso. Após optimização, foi obtida uma taxa de crescimento média de 0.015 h-1, que serviu de referência para o processo de produção à escala industrial. Os resultados obtidos nesta primeira parte do trabalho, foram alcançados pela implementação de um conjunto de metodologias associadas a processos biotecnológicos determinantes para a segunda parte do trabalho. O objectivo da segunda parte do trabalho consistiu em optimizar condições de crescimento de estirpes autóctones de Rhizobium (123Ts2, 19Ms e 55Mp) com o fim de produzir inoculantes com potencial interesse na produção de leguminosas. Para a estirpe Rhizobium leguminosarum bv. trifolii 123Ts2, as maiores concentrações celulares foram obtidas em meio TYG, 28ºC, pH 6 e 50 mM de NaCl. Estes valores, serviram de referência para os ensaios realizados à escala piloto, onde os melhores resultados foram obtidos para um caudal de ar de 2000 ml/min a pH 6 constante. Para a estirpe Sinorhizobium meliloti 19Ms as maiores concentrações celulares registaram-se nos crescimentos efectuados em meio TYG a 28ºC, pH 6 e a 150 mM de NaCl. Já para a estirpe Sinorhizobium meliloti 55Mp concluiu-se que os níveis de temperatura e pH mais elevados estudados permitem taxas de crescimento mais altas, sendo as maiores concentrações celulares atingidas nos crescimentos a pH 6. Nos ensaios à escala piloto procedeu-se à optimização das condições de crescimento para a estirpe Rhizobium leguminosarum bv. trifolii 123Ts2 de modo a se obterem resultados conclusivos que fornecessem informação útil para a produção de inoculantes.
The purpose of the first part of this work regarded the establishment of microaerophilic growth conditions in fermenters, to obtain large yields of Bradyrhizobium japonicum cells overexpressing cbb3 cytochrome oxidase. After optimization, an average growth rate of 0.015 h-1 was obtained, which was used as a reference rate for the large-scale processes. The results acquired from the first part of the work were attained by employing methodologies related to biotechnological processes, which were crucial for the second part of the work. The purpose of the second part consisted of optimizing growth conditions of wild-type strains of Rhizobium, namely 123Ts2 Rhizobium leguminosarum bv. trifolii and 19Ms, and 55Mp Sinorhizobium meliloti, with the objective of obtaining inoculants with a potential interest for leguminous production. The largest cell densities of strain 123Ts2 were obtained in TYG medium, at 28ºC, pH 6.0, and 50 mM NaCl. These values were used as reference for the largescale tests, where the best results were obtained with an air-flow of 2000 ml/min at constant pH of 6.0. Regarding Sinorhizobium strain 19Ms, the highest cell densities were reached in TYG medium, at 28ºC, pH 6.0, and 150 mM NaCl. As for Sinorhizobium strain 55Mp, it was observed that higher temperatures and pH result in higher growth rates, the highest cell densities being attained at pH 6.0. Large-scale growth conditions for Rhizobium leguminosarum bv. trifolii 123Ts2 were optimized to obtain conclusive results in the production of inoculants.
URI: http://hdl.handle.net/10400.26/17348
Aparece nas colecções:IPP - ESAE - Dissertações de Mestrado

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