Estado da arte dos métodos, in vivo e in vitro, de determinação da actividade hemolítica

Garcia, Margarida Augusta da Silva Palla

http://hdl.handle.net/10400.26/13069

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Authors

Garcia, Margarida Augusta da Silva Palla

Advisor(s)

Morais, Zilda

Abstract(s)

Este trabalho teve como objectivo realizar um estudo sobre o estado da arte dos métodos de determinação da actividade hemolítica in vivo e in vitro. Nesse sentido, realizou-se uma revisão bibliográfica sobre esta matéria, no período de Janeiro de 2010 a Maio de 2014, tendo-se encontrado 36 artigos pertinentes. Quanto à natureza do eritrócito-alvo, em 50% dos artigos analisados utilizaram-se eritrócitos humanos; nas restantes publicações investigaram-se maioritariamente eritrócitos de mamíferos, sobretudo de ovelha e coelho. Além de mamíferos, também os eritrócitos de aves, galinhas, foram estudados, em 5 artigos. Em relação ao agente hemolítico, encontraram-se estudos focalizados na acção de microorganismos, de organismos marinhos e terrestres e ainda de compostos sintéticos, sendo que estes últimos representaram 1/3 do total. De modo a caracterizar a diversidade do modo de acção hemolítica, foram examinados com maior detalhe os agentes hemolíticos Candida albicans, fulereno e fenil-hidrazina, bem como a hemoglobina - o principal factor de detecção da actividade hemolítica. Nos 36 artigos estudados, encontraram-se métodos com diferentes graus de aplicabilidade e custo, nomeadamente a detecção visual de actividade hemolítica in vivo, a detecção visual da actividade hemorrágica, a medição dos halos de hemólise, a medição dos halos hemorrágicos, a espectrofotometria de absorção, a microscopia de força atómica e a citometria de fluxo. Os métodos referidos apresentaram-se em ordem crescente de complexidade de execução. De entre as publicações analisadas, 86% adoptaram o método de espectrofotometria de absorção na gama do visível. Esta prevalência deveu-se à sua versatilidade em termos de amostra analisável e à sua boa sensibilidade, além de permitir uma análise quantitativa rápida e a baixo custo.