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Metodologias para preparação e extração de ADN de fragmentos humanos antigos: uma revisão preliminar

2024-10-18Other Open access
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dc.contributor.authorFranco, Magda
dc.contributor.authorCorreia Dias, Helena
dc.contributor.authorBalsa, Filipa
dc.contributor.authorSerra, Armando
dc.contributor.authorAfonso Costa, Heloísa
dc.contributor.authorNascimento, Rui
dc.contributor.authorCorte Real, Francisco
dc.contributor.authorCainé, Laura
dc.contributor.authorAmorim, António
dc.date.accessioned2024-11-27T09:48:53Z
dc.date.available2024-11-27T09:48:53Z
dc.date.issued2024-10-18
dc.descriptionPoster apresentado no 22º Congresso Nacional de Medicina Legal e Ciências Forenses, Estoril, 17-19 de outubro de 2024pt_PT
dc.description.abstractO Laboratório de ADN Antigo do Serviço de Genética e Biologia Forenses da Delegação do Centro do Instituto Nacional de Medicina Legal e Ciências Forenses (INMLCF) tem como objetivo, entre outros, analisar fragmentos humanos antigos (ossos e dentes). Pretende assim, através de análises genéticas, contribuir para estudos relacionados com a evolução de populações antigas humanas, assim como a sua relação com a população atual. A reduzida quantidade de ADN e o elevado nível de degradação são dois dos desafios mais comuns quando se trabalha com ADN antigo (aDNA). É crucial diferenciar o ADN exógeno do aDNA autêntico, visto que estas amostras estão sujeitas a contaminações ambientais e humanas. Tendo em conta a pouca qualidade esperada das amostras, será mais eficaz o estudo do ADN mitocondrial (mtDNA) do que do ADN nuclear, já que o mtDNA está presente nas células num maior número de cópias e apresenta uma configuração molecular circular fechada, que resulta numa maior proteção. Por outro lado, como este ADN é herdado apenas por via materna, o seu estudo não é muito utilizado nas identificações individuais, mas é uma fonte importante de ADN para realizar estudos populacionais, sendo que nos permite obter informações sobre as linhagens maternas dos indivíduos. De acordo com a literatura, os métodos de pré-processamento usados antes da extração de ADN podem afetar a autenticidade e a quantidade de ADN obtido. Várias técnicas de pré-tratamento são utilizadas atualmente, tais como, limpeza da superfície do osso com lixívia, seguido de limpeza com água e, por fim, com etanol. Também é utilizada luz UV para garantir que o ADN extraído será autêntico e não de fontes exógenas. Em análises forenses, os dentes e ossos são normalmente reduzidos a pó para a extração de ADN. Tem sido também demonstrado que é possível obter bons resultados com um método diferente -"scrapping"-, sendo que esta técnica preserva melhor a amostra. No entanto, é necessário avaliar a idade, o estado e o nível de degradação do osso/dente, sendo que amostras frágeis podem ser quebradas facilmente, mesmo com este método. Na fase de extração, existem vários métodos que podem ser usados: métodos baseados em colunas (rápidos,mas produzem pouca quantidade de ADN); e métodos baseados em sílica, precipitação e microfiltros (demorados e trabalhosos, mas produzem melhores resultados). Também existe o método de fenol-clorofórmio (ainda de referência e utilizado por vários anos), que é trabalhoso e envolve riscos para o operador. Em suma, é importante fazer uma revisão dos métodos mais adequados para o tratamento e extração destas amostras difíceis, tendo em conta a manutenção da integridade das mesmas, para que possam ser utilizadas em investigações futuras ou expostas em museus. Assim, esta revisão serve como um primeiro passo para a implementação das metodologias mais adequadas para a obtenção de aDNA autêntico de restos humanos antigos para estudos futuros no Laboratório de ADN Antigo do INMLCF.pt_PT
dc.description.versionN/Apt_PT
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10400.26/52921
dc.language.isoporpt_PT
dc.peerreviewedyespt_PT
dc.subjectaDNApt_PT
dc.subjectfragmentos humanospt_PT
dc.subjectextração DNApt_PT
dc.titleMetodologias para preparação e extração de ADN de fragmentos humanos antigos: uma revisão preliminarpt_PT
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oaire.citation.conferencePlaceEstoril (Portugal)pt_PT
oaire.citation.title22º Congresso Nacional de Medicina Legal e Ciências Forensespt_PT
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person.familyNameCorreia Dias
person.familyNameSerra
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person.familyNameCosta Marcos do Nascimento
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person.identifierAAR-9087-2020
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