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Impacts of a novel mitochondrial-directed antioxidant on bovine sperm function and in vitro embryo development

2020-07-27Master thesis Open access
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dc.contributor.advisorMontezinho, Liliana Cristina Pereira
dc.contributor.authorSantos, João Pedro Campos dos
dc.date.accessioned2020-11-10T12:00:42Z
dc.date.available2023-07-27T00:30:25Z
dc.date.issued2020-07-27
dc.description.abstractOs espermatozóides são particularmente vulneráveis às espécies reativas de oxigénio nas diferentes fases do processo reprodutivo (maturação, capacitação, hiperativação, reação acrossomal). Por esta razão, este trabalho teve como objetivo o estudo do efeito de um inovador antioxidante dirigido às mitocôndrias (AntiOxBEN2) na função espermática e no desenvolvimento embrionário in vitro bovino. Este antioxidante foi adicionado ao meio de capacitação espermática (CAP), durante o processo de swim-up, e ao meio de fertilização (FERT), durante a co-incubação dos oócitos maturados com o sémen capacitado, nas concentrações de 0 (controlo), 1 e 10 μM. Foram assim constituídos 7 grupos: (1): CAPcontrolo x FERTcontrolo; (2): CAPcontrolo x FERT1; (3): CAPcontrolo x FERT10; (4): CAP1 x FERTcontrolo; (5): CAP1 x FERT1; (6): CAP10 x FERTcontrolo; (7): CAP10 x FERT 10. Após o swim-up foi avaliada a motilidade espermática (CASA e análise visual), a vitalidade (eosina-negrosina), o potencial de membrana mitocondrial (JC1) e o metabolismo basal (Seahorse Xfe96) dos espermatozoides. Foi igualmente avaliado o desenvolvimento e a qualidade dos embriões produzidos. O grupo CAP1 x FERT1 apresentou a maior taxa de clivagem, comparativamente ao grupo controlo (p<0.04). Foi identificado um efeito positivo do AntiOxBEN2 no potencial de membrana mitocondrial (p≤0.003) e, consequentemente, na qualidade espermática, enquanto que a concentração mais elevada prejudicou a motilidade progressiva e o número de embriões produzidos. Os resultados demonstraram um efeito benéfico do AntiOxBEN2 (na concentração de 1 μM) nos processos de capacitação espermática e na fertilização, melhorando o desenvolvimento embrionário.pt_PT
dc.description.abstractSperm cells are particularly vulnerable to reactive oxygen species at different stages of the reproductive process (maturation, capacitation, hyperactivation and acrosomal reaction). For this reason, our objective was to study the effect of a novel mitochondrial-directed antioxidant, AntiOxBEN2, on bovine sperm function and in vitro embryo development. This antioxidant was added to the semen capacitation medium (CAP), during the swim-up, and to the fertilization medium (FERT) during the co-incubation of matured oocytes and capacitated spermatozoa, in concentrations of 0 (control), 1 and 10 μM. Thus, 7 groups were constituted: (1): CAPcontrol x FERTcontrol; (2): CAPcontrol x FERT1; (3): CAPcontrol x FERT10; (4): CAP1 x FERTcontrol; (5): CAP1 x FERT1; (6): CAP10 x FERTcontrol; (7): CAP10 x FERT 10. After the swim-up, sperm motility (CASA and visual analysis), vitality (eosin-nigrosin), mitochondrial membrane potential (JC1) and basal metabolism (Seahorse Xfe96) were evaluated. Embryonic development and quality of produced embryos were assessed. Higher cleavage rate was obtained in CAP1 x FERT1 compared to control (p<0.04). A positive effect of AntiOxBEN2 on the mitochondrial membrane potential (p≤0.003) and, consequently, on the sperm quality was identified, although the highest dose impaired progressive motility and the number of produced embryos. The results demonstrate a beneficial effect of AntiOxBEN2 (1 μM) on sperm capacitation and fertilization processes, thus improving embryonic development.pt_PT
dc.identifier.tid202535657pt_PT
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10400.26/34026
dc.language.isoengpt_PT
dc.subjectAntioxidante dirigido à mitocôndriapt_PT
dc.subjectBovinopt_PT
dc.subjectCapacitação de sémenpt_PT
dc.subjectDesenvolvimento embrionário in vitropt_PT
dc.subjectEspécies reativas de oxigéniopt_PT
dc.subjectFertilizaçãopt_PT
dc.subjectStress oxidativopt_PT
dc.subjectBovinept_PT
dc.subjectFertilizationpt_PT
dc.subjectin vitro embryo developmentpt_PT
dc.subjectMitochondrial-directed antioxidantpt_PT
dc.subjectOxidative stresspt_PT
dc.subjectReactive oxygen speciespt_PT
dc.subjectSperm capacitationpt_PT
dc.titleImpacts of a novel mitochondrial-directed antioxidant on bovine sperm function and in vitro embryo developmentpt_PT
dc.typemaster thesis
dspace.entity.typePublication
rcaap.rightsopenAccesspt_PT
rcaap.typemasterThesispt_PT
thesis.degree.nameMedicina Veterináriapt_PT

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