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A implementação de um sistema de PCR em multiplex na identificação de amostras forenses em diferentes substratos - kit Investigator 26Plex QS

2023-10-12Conference object Restricted access
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dc.contributor.authorCardoso, Paula
dc.contributor.authorSerra, Armando
dc.contributor.authorBogas, Vanessa
dc.contributor.authorBalsa, Filipa
dc.contributor.authorLopes, Virgínia
dc.contributor.authorPorto, Maria João
dc.contributor.authorAmorim, António
dc.contributor.authorCorte Real, F.
dc.contributor.authorBrito, Pedro
dc.date.accessioned2023-10-17T10:23:16Z
dc.date.available2023-10-17T10:23:16Z
dc.date.issued2023-10-12
dc.descriptionComunicação apresentada no 21º Congresso Nacional de Medicina Legal e Ciências Forenses, Lamego, 2023pt_PT
dc.description.abstractA individualidade humana concede a cada individuo uma personalidade jurídica e uma identidade pessoal. Esta unicidade possibilita a identificação humana que constitui-se como o alicerce da Genética e Biologia Forenses, que compreende o estudo e caracterização de marcadores polimórficos de ADN (Ácido Desoxirribonucleico), designados Short Tandem Repeats (STRs). Dado que a perícia produzida por esta área científica apresenta um elevado poder probatório, impõem-se uma atualização dos procedimentos implementados, visando incrementar a confiabilidade dos resultados obtidos. O presente projeto teve como propósito avaliar a adequabilidade do kit Investigator® 26Plex QS, Qiagen, à casuística do laboratório Serviço de Genética e Biologia Forenses da Delegação do Centro do INMLCF, I.P., por meio de uma validação interna extensiva que visou a sua posterior implementação. Com este trabalho pretendeu-se relatar os procedimentos e parâmetros utilizados no decurso da validação interna deste ensaio, que encalçaram diretrizes internacionais da SWGDAM, assim como expender os resultados obtidos. Primeiramente, houve a necessidade de fixar critérios únicos de análise que permitissem validar e interpretar os perfis genéticos obtidos nos ensaios subsequentes. De seguida, pretendeu-se aferir o desempenho do kit, verificando a sua concordância com metodologias normalizadas no SGBF-C e avaliando a sua sensibilidade, especificidade, robustez e precisão. Complementarmente, foram efetuadas alterações ao protocolo original, nomeadamente redução de volume e amplificação direta, com vista a obter uma metodologia protocolar otimizada à rotina laboratorial. Este estudo compreendeu a análise de amostras biológicas provenientes de variados substratos, incidindo-se o estudo sobre amostras problema, de referência e amostras simuladas. O procedimento geral incluiu a extração de ADN, seguindose a sua quantificação, quando necessária, e, posterior amplificação pelo kit Investigator® 26plex QS. A eletroforese capilar realizou-se no sequenciador automático Applied Biosystems™ 3500 Genetic Analyzer, sendo a análise dos eletroferogramas efetuada no software GeneMapper™ ID-X 1.6.. Com este trabalho foi possível caracterizar as principais vantagens do kit Investigator® 26plex QS, assim como as suas limitações. Demonstrando-se que este kit de amplificação de ADN humano evidencia elevada robustez, confiabilidade, especificidade e sensibilidade, que permite a obtenção de um perfil genético completo com apenas 15 células humanas (1 ng de ADN).pt_PT
dc.description.versioninfo:eu-repo/semantics/publishedVersionpt_PT
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10400.26/47283
dc.language.isoporpt_PT
dc.peerreviewedyespt_PT
dc.subjectPCR em multiplexpt_PT
dc.subjectValidação Internapt_PT
dc.subjectLimiares de Análisept_PT
dc.titleA implementação de um sistema de PCR em multiplex na identificação de amostras forenses em diferentes substratos - kit Investigator 26Plex QSpt_PT
dc.typeconference object
dspace.entity.typePublication
oaire.citation.conferencePlaceLamego (Portugal)pt_PT
oaire.citation.title21º Congresso Nacional de Medicina Legal e Ciências Forensespt_PT
person.familyNameNeves Cardoso
person.familyNameBogas
person.familyNameAmorim
person.familyNameCorte Real Gonçalves
person.familyNameBrito
person.givenNamePaula Liliana
person.givenNameVanessa
person.givenNameAntónio
person.givenNameFrancisco
person.givenNamePedro
person.identifier.ciencia-id4814-A310-A09E
person.identifier.ciencia-idD71C-9C88-4E0E
person.identifier.ciencia-id0B18-918A-80ED
person.identifier.orcid0000-0003-0361-9768
person.identifier.orcid0000-0001-7929-5814
person.identifier.orcid0000-0002-7506-4426
person.identifier.orcid0000-0003-1495-9362
person.identifier.orcid0000-0002-9622-8303
person.identifier.ridA-4414-2013
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Comunicação apresentada no 21º Congresso Nacional de Medicina Legal e Ciências Forenses, Lamego, 2023
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