IPC-ESTeSC - Dissertações de mestrado
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- Avaliação da actividade da proteína C E expressão de CD64 nos neutrófilos como marcadores de diagnóstico precoce na sepsisPublication . Oliveira, Ana Cristina da Silva; Ribeiro, Maria Letícia de Sousa; Fidalgo, Teresa de Jesus SemedoIntrodução: Na investigação da fisiopatologia dos distúrbios hemostáticos de doentes com sepsis, a proteína C (PC) tem despertado um interesse particular devido ao seu papel central nos sistemas da coagulação e fibrinólise. Na sepsis há diminuição dos níveis de PC, resultante do aumento de consumo, degradação e/ou diminuição de síntese, e os níveis baixos têm sido apontados como predictores de severidade e grau de disfunção orgânica. Na região promotora do gene da PC (PROC) há dois polimorfismos funcionais, -1654C/T e -1641A/G, que foi demonstrado que condicionam os níveis de PC em indivíduos normais e, mais recentemente, tem vindo a ser discutido o seu papel como factor agravante na sepsis. A expressão do CD64 nos neutrófilos tem sido proposta como um indicador laboratorial de infecção severa e sepsis. O receptor membranar definido pelo anticorpo monoclonal CD64 é um receptor de elevada afinidade para imunoglobulinas (FcγRI) e é expresso nos monócitos maduros e em níveis muito baixos nos neutrófilos não activados. O aumento da expressão do CD64 nos neutrófilos parece ser um marcador sensível de infecção e sepsis. Objectivos: O objectivo principal deste estudo foi analisar, nos doentes com sepsis, alterações precoces dos níveis da PC e da expressão do CD64 nos neutrófilos e pesquisar a sua correlação com a severidade e prognóstico da doença. Foi ainda analisada a correlação entre os polimorfismos, -1654C/T, -1641A/G e -1476A/T na região promotora do gene PROC e os níveis de PC e a severidade da sepsis. Material & Métodos: Trinta e sete doentes com sepsis foram agrupados em 3 grupos, consoante a severidade: 1) sepsis (n = 10), 2) sepsis severa (n = 8), 3) choque séptico (n = 19). Aquando da admissão na Unidade de Cuidados Intensivos (ICU) foram quantificados os níveis de proteína C, fibrinogénio, d-dímeros, procalcitonina e proteína C reactiva e a expressão de CD64 nos neutrófilos (pelas metodologias de citometria de fluxo convencional e do CD-Sapphire). Posteriormente foram pesquisados os polimorfismos da região promotora do gene PROC. Cinquenta voluntários saudáveis foram estudados como grupo controlo para determinação dos níveis de PC, análise do genótipo da região promotora PROC e determinação dos níveis de expressão do CD64 nos neutrófilos. Para análise estatística dos resultados foi utilizado o programa Graph Pad Prism versão 5.00. Resultados: Observou-se uma diminuição dos níveis de PC com o agravamento dos estadios de sepsis (p=0.0018), com níveis mais baixos no grupo de doentes com choque séptico. No grupo controlo verificou-se uma diferença estatisticamente significativa (-16%; p=0.0375) nas médias dos níveis de PC entre os indivíduos com os genótipos TT/AA/AA (116%) e CC/GG/TT (100%). Relativamente aos doentes com sepsis, observou-se uma diferença estatisticamente significativa na média dos níveis de PC entre o grupo do genótipo CC/AA/AA (81%) comparado aos grupos com os genótipos TT/AA/AA (35.5%; p=0.0350) e CC/GG/TT (30%; p=0.0009). A expressão de CD64 nos neutrófilos, por ambas as metodologias, está aumentada nos doentes com sepsis em relação ao grupo controlo (diferença com significado estatístico, p<0.0001); o número de moléculas de CD64 por célula (por citometria de fluxo) aumenta gradualmente com a severidade da sepsis, com níveis mais elevados no choque séptico. Conclusão: Neste grupo de doentes com sepsis, avaliados no momento em que deram entrada na UCI, os níveis de PC e a expressão de CD64 nos neutrófilos permitem confirmar o diagnóstico; o número de moléculas de CD64 /célula correlacionam-se significativamente com a severidade da sepsis, fornecendo uma informação adicional fidedigna para a avaliação da gravidade do quadro clínico. Este estudo confirmou a correlação entre os polimorfismos -1654C/T e -1641A/G da região promotora do gene PROC e os níveis plasmáticos de PC no grupo controlo. No que diz respeito aos doentes com sepsis, embora estes resultados ainda sejam preliminares e o estudo ainda esteja em curso, os genótipos CC/GG, TT/AA e CT/AG parecem estar associados a estadios de maior severidade de sepsis.
- Quantificação e caracterização fenotípica e funcional das células NK do sangue periférico em lúpus eritematoso sistémico (LES)Publication . Teixeira, Luís Filipe dos Santos, 1986-; Paiva, Artur Augusto; Teixeira, António José Martinho GomesIntrodução: O Lúpus Eritematoso Sistémico (LES) é uma doença inflamatória crónica auto-imune que afecta múltiplos órgãos. A sua etiologia é multifactorial, em que a interacção entre factores genéticos, hormonais, ambientais e infecciosos leva à perda de tolerância imunológica e à produção de auto-anticorpos dirigidos principalmente contra antigénios nucleares, alguns dos quais participam nas lesões teciduais. As células NK através das suas capacidades citotóxicas e produção de citocinas inflamatórias podem influenciar as doenças auto-imunes. Objectivos: O objectivo deste estudo foi quantificar e analisar as características imunofenotípicas e funcionais das duas principais subpopulações de células NK nos pacientes com LES. Material e Métodos: Este estudo incidiu numa população de 44 indivíduos com diagnóstico de LES, dos quais 18 se encontravam na fase activa e 26 na fase inactiva da doença e em 30 indivíduos saudáveis, que constituíram o grupo controlo. Para este universo populacional, foi estudada a percentagem (%) e número absoluto de células NK, assim como das suas duas subpopulações, CD56dim e CD56bright, no sangue periférico e a frequência com que estes dois grupos celulares expressam o antigénio CD57 e o receptor de quimiocina CXCR3, e produzem interferon-gama (IFN- γ), factor de necrose tumoral-alfa (TNF- α), granzima B e perforina, assim como a quantidade de proteína por célula (MIF - média de intensidade de fluorescência), por citometria de fluxo. Resultados: Os resultados obtidos revelam uma clara diminuição dos números absolutos e relativos de células NK nos doentes com LES, principalmente naqueles com doença activa, enquanto que as proporções dos subtipos de células NK, não foram afectadas. Nos pacientes com LES activo encontrámos uma baixa densidade de CXCR3 em ambos os subtipos de células NK e uma baixa frequência de células NK CD56dim a expressar CXCR3. Para além disso, observámos que a expressão de granzima B nos dois grupos de doentes com LES está diminuída mas a percentagem de células NK a expressar granzima B e perforina está aumentada, especialmente na doença activa. Observou-se uma diminuição na percentagem de células NK CD56dim e CD56bright a produzir TNF- α e na sua expressão nas células NK CD56dim na doença activa, enquanto que a expressão de IFN- γ nas células NK CD56bright está aumentada em todos os pacientes com LES. Conclusão: Os nossos resultados sugerem que as células NK apresentam alterações funcionais e fenotípicas únicas, que são particularmente evidentes na doença activa, e podem afectar o desenvolvimento da doença.
- Alterações genéticas em síndromes mielodisplásicos: definição da sequência de aparição de ditas alterações genéticas mediante técnica de FISH interfásica em diferentes compartimentos de células hematopoiéticas da medula ósseaPublication . Lopes, Catarina Isabel Amaral; Orfão, Alberto; Gabriel, António JoséAs síndromes mielodisplásicas (SMD) são um grupo de distúrbios clonais caracterizadas por uma hematopoiese ineficaz evoluindo 20-30% dos casos para Leucemia Mieloblástica Aguda (LMA). São descritas diferentes alterações citogenéticas (del 5q, del 7q, -Y, del 20q e trissomia 8) em cerca de 50-60% dos pacientes com SMD primário e até 80% nos secundários, preponderantes para o desenvolvimento da patologia, bem como avaliação prognóstica, monitorização da resposta terapêutica e avaliação da sobrevida e risco de evolução para leucemia. Diferentes metodologias são utilizadas no estudo citogenético, nomeadamente a técnica de hibridização in situ de fluorescência (FISH) Interfásica, que apresenta uma maior sensibilidade e aplicabilidade. Foi objectivo desta tese de dissertação a identificação das alterações citogenéticas mais frequentes em cada linha celular estudada (células CD34+, neutrófilo, monócito, eritrócito, linfócito, basófilo, mastócito, eosinófilo e célula plasmática) bem como procurar estabelecer uma linha orientadora do ponto de vista da sequência de aparição das referidas alterações genéticas nos diferentes compartimentos celulares. Foram estudadas 42 amostras de medula óssea de doentes com SMD, dos quais 10 são CRDM, 11 são AREB-I, 15 são AREB-II, 4 são Síndromes mieloproliferativos SMP/SMD, uma amostra com displasia ligeira e uma amostra classificada como LMA secundária a SMD, sendo 5 do sexo feminino e 37 do sexo masculino. Efetuou-se uma separação celular por cell sorting das populações celulares de interesse e posteriormente realizou-se um protocolo de FISH para a identificação das dita alterações genéticas. Os resultados deste estudo sugerem uma incidência relativamente significativa das diferentes alterações citogenéticas nas distintas linhas celulares de cada amostra. De modo particular, são observados alguns casos que sugerem um aparecimento secundário das alterações citogenéticas estudadas ao longo da maturação celular. Nos casos de CRDM parece surgir inicialmente a delecção 5q e 7q e numa fase posterior a perda do cromossoma Y e a delecção 20q. Por sua vez, nos casos de AREB, parece surgir em primeiro lugar a delecção 7q seguida da delecção 5q e da trissomia 8, aparecendo raramente a perda do cromossoma Y e do 20q. Os resultados apontam para a ocorrência de alterações genéticas em mielodisplasia e em distintas linhas celulares com implicações ao nível do prognóstico, avaliação da resposta terapêutica e sobrevida dos doentes.
- Papel dos monócitos,células dendríticas CD16+ E mielóides do sangue periférico produtores de quimiocinas no lúpus eritematoso sistémicoPublication . Rodrigues, Ana Elisa Baptista; Paiva, Artur Augusto; Velada, Isabel de Jesus Pereira Godinho deIntrodução: O Lúpus Eritematoso Sistémico (LES) é uma doença autoimune crónica caracterizada por autoanticorpos, formação e deposição de imunocomplexos e vasculite sistémica. Os doentes com LES exibem numerosas alterações do sistema imune envolvendo as células B, células T e células apresentadoras de antigénio (APC) como os monócitos e células dendríticas, resultando numa activação e consequente aumento do processamento e apresentação de antigénios. No LES, anormalidades nos monócitos e nas células dendríticas do sangue periférico, têm sido relatadas, encontrando-se essas alterações relacionadas com a fisiopatologia e actividade da doença. Estudos recentes descreveram alterações, quer no número destas células no sangue periférico quer da sua capacidade para produzir citocinas inflamatórias, estado de activação e expressão de receptores de quimiocinas. As quimiocinas estão envolvidas na migração, tráfego e quimiotaxia de leucócitos e existe uma grande evidência que a infiltração de linfócitos T e outros leucócitos nos locais de inflamação tem um papel importante no LES. Estudos recentes têm mostrado elevadas concentrações séricas das quimiocinas CCL2 (MCP-1), CCL4 (MIP-1β), CCL5 (RANTES), CXCL9 (MIG) e CXCL10 (IP10) em doença activa. Objectivos: Quantificar a expressão génica das quimiocinas inflamatórias IP-10, RANTES, MIG, MCP-1 e MIP-1β, após separação celular, em Mónocitos, Células Dendríticas (CD) CD16+ e CD mielóides com vista a esclarecer o papel destas células na fisiopatologia da doença. Métodos: O estudo incluiu 73 indivíduos, 43 com LES, 18 com LES activo (LESA) e 25 com LES inactivo (LESI) e 30 controlos saudáveis. A frequência e número absoluto de monócitos e DC foram determinados por citometria de fluxo. A expressão das quimiocinas IP-10, RANTES, MIG, MCP-1, MIP-1β foi quantificada por PCR em tempo real. Resultados: Em monócitos purificados observou-se um aumento da expressão de mRNA de CCL2, CXCL9 e CXCL10 no grupo de LESA comparado com o grupo de Controlo. Não foram encontradas diferenças na expressão de mRNA de CCL4 e CCL5 nos grupos em estudo. Relativamente ao subgrupo de CD, CD14-/lowCD16+ o perfil de expressão de mRNA de CXCL9 e CXCL10 foi similar ao encontrado em monócitos. Nas CD mielóides não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas relativamente à expressão das quimiocinas CXCL9 e CXCL10. Conclusão: O aumento da expressão de mRNA de quimiocinas nos monócitos e nas CD CD14- /lowCD16+ do sangue periférico em doentes com LES parece estar relacionada com a fisiopatologia e actividade da doença.
- Ler, ou não ler: eis a questãoPublication . Vicente, Joana Raquel Brito, 1988-; Salgado, Lucília Maria Cardoso, 1950-A literacia em saúde é de extrema importância em contexto familiar. Neste sentido, todos os setores sociais se devem envolvem para melhorar o estado de saúde das famílias. A capacitação dos cidadãos permite-lhes uma procura constante de qualidade de vida. A literacia é um meio de compreensão da informação escrita, útil ao dia a dia de cada um, que permite consciencializar as pessoas para tomadas de decisões acertadas. Numa amostra de doze participantes do concelho de Tábua (seis crianças e seis adultos), com idades entre os 8 e os 40 anos, foram avaliados hábitos de leitura e qual a sua relação com a alimentação, o exercício físico, as emoções e a higiene. Através de um processo de investigação-ação, da participação ativa e do empowerment foram realizadas sessões lúdicas e temáticas com o público infantil, adulto e em família. Após esta intervenção foi visível o interesse e a motivação destas famílias na melhoria da sua qualidade de vida, partindo da literacia em saúde. Este facto demonstra a vontade dos intervenientes em participar em programas de promoção para a saúde, o que permite concluir que projetos desta natureza são importantes para a comunidade de Tábua, que apresenta baixos níveis de literacia
- Educação em sexualidade em contexto não formalPublication . Santos, Andreia San-Bento dos; Teixeira, Maria Filomena Rodrigues, 1959-; Martins, Maria Helena Carvalho Gomes CaldeiraA educação em sexualidade é atualmente uma prioridade nas escolas que envolve todos os professores e professoras, qualquer que seja a sua área disciplinar. Sabendo que a maioria dos/as docentes tem dificuldade em delinear estratégias para abordar os conteúdos sobre sexualidade que a lei prevê, este projeto de intervenção tem como objetivo principal construir uma atividade em contexto não formal que complemente as estratégias desenvolvidas na escola. A metodologia usada incluiu a validação de três módulos construídos e de materiais didáticos elaborados (jogos e perguntas orientadoras). A “Aula sobre Sexualidade” foi implementada com uma turma do 10º ano. Pelo feedback dado, através de questionários, pelos/as especialistas, professores/as e alunos/as, parece que a atividade constitui um claro contributo na educação em sexualidade, em contexto não formal, como complemento das atividades desenvolvidas na escola, em contexto formal.
- Negligência nos cuidados infantis : como identificar… como atuar…Publication . Rajado, Helena Isabel Fresco Barreto; Amaral, Ana Paula, 1965-A negligência é a situação de perigo mais identificada nos Relatórios Anuais da Actividade das Comissões de Protecção de Crianças e Jovens dos últimos anos. Compreender melhor a negligência, o que é, quem é afetado, qual o seu impacto, como se pode intervir, são passos importantes para a abordagem do problema. Os objetivos do presente trabalho são verificar a eficácia da identificação de situações de risco por parte dos profissionais que contactam diariamente com crianças e verificar se as situações de perigo relacionadas com a negligência são detetadas pelas diferentes categorias profissionais de igual forma. É, também, objetivo a elaboração de um manual que reúna informação de apoio aos profissionais e à comunidade. Tendo por base os dois primeiros objetivos, os participantes (profissionais das áreas de saúde e educação) responderam a um questionário, classificando situações hipotéticas passíveis de serem consideradas como negligência. No que diz respeito ao último objetivo, foi realizada uma sessão com profissionais da educação para avaliar a contribuição do manual para a melhoria da saúde. Os dados obtidos revelam uma significativa eficiência no que diz respeito à identificação da negligência por parte dos participantes e mostram não haver diferenças expressivas na capacidade de análise das situações entre as diferentes categorias profissionais. Relativamente ao manual elaborado, profissionais da educação referiram que este desperta para situações que facilmente passam ocultas sendo, por isso, desvalorizadas pelos profissionais que não as consideram de imediato como atos de negligência. Em conclusão, o presente projeto contribuiu e pretende continuar a contribuir para o reconhecimento dos sinais, sintomas e indicadores de negligência, para desta forma se poder diminuir os índices de negligência infantil no concelho de Montemor-o-Velho e, consequentemente, obter ganhos em saúde.
- Orientação sexual, homofobia e educaçãoPublication . Carvalho, Micaela Leite Santos Montezuma de; Teixeira, Maria Filomena Rodrigues, 1959-O presente projeto visa contribuir para a construção de conhecimentos que permitam uma melhor compreensão da homofobia e perceber as perspetivas dos/as alunos/as relativamente às mensagens discriminatórias e estereotipadas veiculadas pela série televisiva Glee. A intervenção envolveu uma turma de 9º ano de escolaridade, constituída por 19 alunos/as. A opção pela metodologia de projeto permitiu-nos sensibilizar os/as alunos/as para a necessidade do reconhecimento das diferentes orientações sexuais e possibilitou, igualmente, a reflexão acerca das manifestações de violência, preconceito e discriminação de que são alvo os indivíduos que assumem identidades não heterossexuais.
- Sexualidade e género : as relações interpessoais nos mediaPublication . Marques, Sónia Alexandra Veríssimo; Teixeira, Maria Filomena Rodrigues, 1959-Este projeto teve como finalidade promover a construção de conhecimentos e o desenvolvimento de competências que permitissem aos/às alunos/as analisar criticamente o currículo cultural definido pelos media em matéria de sexualidade e género e compreender a sua influência na estruturação das relações interpessoais, tendo em vista a educação para uma cidadania democrática e para os direitos humanos. A intervenção, que decorreu numa turma do 5.º ano de escolaridade, constituída por 21 alunos/as, envolveu-os ativamente na realização de várias atividades, tendo sido privilegiado o diálogo e a reflexão conjunta. A metodologia participativa usada permitiu, não só diagnosticar a compreensão dos/as alunos/as relativamente às representações proporcionadas numa série televisiva juvenil de sucesso, aos estereótipos e valores nela veiculados e à sua influência nas várias dimensões da vida pessoal e social, mas também, promover uma análise crítica e reflexiva das mensagens (visuais e linguísticas) de sexualidade e género veiculadas na série.
- Cuidar de quem cuida : projecto de educação para a saúde para cuidadores informais de crianças e jovens dependentesPublication . Costa, Mara Filipa Cecílio Vieira da; Amaral, Ana Paula, 1965-“Cuidar de Quem Cuida” foi um projecto de intervenção no âmbito da educação para a saúde, que teve como principal objectivo atender às necessidades do cuidador informal de crianças e jovens com dependência média a elevada na realização das actividades de vida diária, planeando e concretizando acções que visaram a autonomia, qualidade de vida e bem-estar do cuidador e família. A amostra foi constituída por 14 utentes inscritos no CSNM e USFB, com consultas médicas de especialidade no HPC e que cumpriram os critérios de inclusão: menor com grau de dependência média a elevada, cuidador desempregado e/ou com sobrecarga física ou emocional elevada e existência inadequada de factores influentes à adaptação da família à doença. Foram utilizados como instrumentos de colheita de dados: a entrevista individual inicial, índice para a avaliação das dificuldades do prestador de cuidados (CADI) e inquérito final de satisfação. O Projecto consistiu nas seguintes intervenções: sessões temáticas e grupo de apoio, página electrónica da rede social Facebook, visita domiciliar e parceria com a Escola Superior de Enfermagem de Coimbra. Os resultados obtidos, relativos ao CADI, evidenciam que os cuidadores são maioritariamente mulheres/mães, que apresentam níveis elevados de sobrecarga física, emocional e social, cujas maiores dificuldades percepcionadas são o deficiente apoio familiar e profissional e a escassez de recursos financeiros. Em relação às sessões temáticas/grupo de apoio, participaram 50% dos cuidadores e constatou-se o aparecimento de fenómenos sociais e de saúde como a coesão do grupo, a aquisição de comportamentos mais adequados, autoanálise e autoapreciação da sua situação de saúde e familiar. Por outro lado, 13 dos 14 participantes aderiram, activamente, à página electrónica. Todas as intervenções foram desenvolvidas no sentido do empowerment e de forma, a colmatar as dificuldades percepcionadas pelos cuidadores e famílias. Obtiveram-se ganhos efectivos em termos de saúde, nomeadamente maior capacidade de resiliência, modificação de comportamentos/atitudes inadequados e aquisição de mecanismos de coping eficazes, o que reforça a importância da implementação de projectos centrados da educação para a saúde e especificamente dirigidos a esta população-alvo.