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EM - IUEM - Tecnologias Laboratoriais em Ciências Forenses

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http://hdl.handle.net/10400.26/30720

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Browsing EM - IUEM - Tecnologias Laboratoriais em Ciências Forenses by advisor "Bekman, Evguenia"

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  • Evaluating the effects of cannabinoids on an organoid-based model of prenatal exposure
    Publication . Gomes, Rita Covas; Tenreiro, Sandra; Bekman, Evguenia; Lemos, Luísa de; Quintas, Alexandre
    Nos últimos anos, a prevalência do uso de canabinóides tem aumentado rapidamente, inclusive em mulheres grávidas. Fitocanabinóides, substâncias extraídas da Cannabis sativa, atuam principalmente pela ligação aos recetores canabinóides 1 e 2 (CB1R e CB2R), exercendo efeitos psicoativos e não psicoativos. Os canabinóides sintéticos são uma classe de Novas Substâncias Psicoativas, e apresentam altas afinidades de ligação aos CB1/2R. Visto que o sistema endocanabinóide é altamente relevante para o desenvolvimento embrionário, temos como hipótese que o consumo de canabinóides durante a gravidez pode causar defeitos no neurodesenvolvimento. Assim, foi utilizado um modelo tridimensional que recapitula os passos iniciais do neurodesenvolvimento. Organoides corticais com 46 dias foram gerados e expostos aos fitocanabinóides Δ9-tetrahidrocanabinol (Δ9-THC) e canabidiol (CBD), e aos canabinóides sintéticos THJ-018 e EG-018 por 9 dias, mimetizando a exposição pré-natal aos mesmos. Estes foram também administrados na presença de um antagonista dos CB1R, para determinar se os seus efeitos são mediados por estes recetores. Análises de imunofluorescência, RNA e Western Blot foram realizadas para avaliar alterações em marcadores de diferenciação neuronal, e na expressão dos recetores canabinóides. Foi efetuado single-cell calcium imaging para avaliar a funcionalidade celular. Embora preliminares, estes resultados sugerem que o Δ9-THC pode retardar a diferenciação neuronal e afetar a funcionalidade celular por mecanismos mediados pelos CB1R. O CBD induziu mínimas alterações nestes parâmetros, mas evidenciou a interação complexa entre CB1R e CB2R. Os canabinóides sintéticos THJ-018 e EG-018 apresentaram um impacto mais negativo comparativamente aos fitocanabinóides. Estes induziram uma redução de progenitores neurais e neurónios maduros, e um aumento da apoptose, sugerindo efeitos neurotóxicos. Algumas destas alterações não foram revertidas pelo antagonista dos CB1R, indicando a interação com outros recetores. No entanto, os nossos resultados não obtiveram significância estatística, evidenciando a necessidade de validação adicional. Contudo, este projeto demonstra o potencial dos canabinóides para impactar o neurodesenvolvimento embrionário, evidenciando a importância da investigação científica sobre exposição pré-natal a canabinóides.
    2022-12-21Master thesis Embargoed access Show more