Orfão, AlbertoGabriel, António JoséLopes, Catarina Isabel Amaral2022-07-052022-07-052011http://hdl.handle.net/10400.26/41281As síndromes mielodisplásicas (SMD) são um grupo de distúrbios clonais caracterizadas por uma hematopoiese ineficaz evoluindo 20-30% dos casos para Leucemia Mieloblástica Aguda (LMA). São descritas diferentes alterações citogenéticas (del 5q, del 7q, -Y, del 20q e trissomia 8) em cerca de 50-60% dos pacientes com SMD primário e até 80% nos secundários, preponderantes para o desenvolvimento da patologia, bem como avaliação prognóstica, monitorização da resposta terapêutica e avaliação da sobrevida e risco de evolução para leucemia. Diferentes metodologias são utilizadas no estudo citogenético, nomeadamente a técnica de hibridização in situ de fluorescência (FISH) Interfásica, que apresenta uma maior sensibilidade e aplicabilidade. Foi objectivo desta tese de dissertação a identificação das alterações citogenéticas mais frequentes em cada linha celular estudada (células CD34+, neutrófilo, monócito, eritrócito, linfócito, basófilo, mastócito, eosinófilo e célula plasmática) bem como procurar estabelecer uma linha orientadora do ponto de vista da sequência de aparição das referidas alterações genéticas nos diferentes compartimentos celulares. Foram estudadas 42 amostras de medula óssea de doentes com SMD, dos quais 10 são CRDM, 11 são AREB-I, 15 são AREB-II, 4 são Síndromes mieloproliferativos SMP/SMD, uma amostra com displasia ligeira e uma amostra classificada como LMA secundária a SMD, sendo 5 do sexo feminino e 37 do sexo masculino. Efetuou-se uma separação celular por cell sorting das populações celulares de interesse e posteriormente realizou-se um protocolo de FISH para a identificação das dita alterações genéticas. Os resultados deste estudo sugerem uma incidência relativamente significativa das diferentes alterações citogenéticas nas distintas linhas celulares de cada amostra. De modo particular, são observados alguns casos que sugerem um aparecimento secundário das alterações citogenéticas estudadas ao longo da maturação celular. Nos casos de CRDM parece surgir inicialmente a delecção 5q e 7q e numa fase posterior a perda do cromossoma Y e a delecção 20q. Por sua vez, nos casos de AREB, parece surgir em primeiro lugar a delecção 7q seguida da delecção 5q e da trissomia 8, aparecendo raramente a perda do cromossoma Y e do 20q. Os resultados apontam para a ocorrência de alterações genéticas em mielodisplasia e em distintas linhas celulares com implicações ao nível do prognóstico, avaliação da resposta terapêutica e sobrevida dos doentes.The myelodysplastic syndromes (MDS) are a group of clonal disorders characterized by impaired hematopoiesis and 20-30% evolutes for Acute Myeloblastic Leukemia (AML). There are recognized different cytogenetic features (del 5q, del 7q, -Y, del 20q and trisomy 8) in about 50-60% of primary myelodysplastic syndromes and until 80% of secondary MDS, prevalent for pathogenesis, prognostic evaluation, therapeutic and overall survival analysis and risk of leukemic transformation. Different methods are used for cytogenetic study, namely Fluorescent in situ Hibridization (FISH), which is more sensitive and with more applications. The aim of this thesis was the identification of the most frequent cytogenetic alterations in each cellular line (CD34+ cells, neutrophil, monocyte, erythrocyte, lymphocyte, basophil, mast cell, eosinophil and plasma cell ) and establish a guideline for the time of appearance of such cytogenetic alterations in the different compartments of bone marrow hematopoietic cells from myelodysplastic syndromes patients. For this purpose 42 MDS bone marrow samples were studied: 10 were RCMD, 11 RAEB-I, 15 RAEB-II, 4 MPS/MDS, one sample with slight dysplasia and one sample classified as AML secondary to myelodysplasia, 5 of them female and 37 male. After a cell sorting procedure, to obtain different cellular populations, a hybridization protocol was performed to identify the studied cytogenetic anomalies. The results pointed to a relative incidence of cytogenetic alterations in the different cell lines studied. Distinctly, some cases suggested a secondary appearance of the referred cytogenetic alterations along cellular maturation. In RCMD cases it seems to initially arise the deletion of 5q and 7q, and at a later stage the loss of Y chromosome and 20q. In turn, in RAEB cases the first genetic abnormality appearing is the deletion of 7q followed by the deletion of 5q and trisomy 8, and rarely the loss of Y chromosome and 20q. These results pointed for the occurrence of cytogenetic features in patients with myelodysplasia and in distinct cellular lines providing new insights in terms of additional relevant clinical and prognostic information.porAlterações citogenéticasSíndromes mielodisplásicasTécnica de FISH interfásicaCytogeneticsMyelodysplastic syndromesInterphase FISHmaster thesis